1.參比溶液和溶劑的選擇

　　分光光度計(jì)的測(cè)量實(shí)際上是以通過(guò)參比池的光強(qiáng)度作為入射光強(qiáng)度來(lái)測(cè)定試樣的吸光度，先調(diào)節(jié)儀器使透過(guò)參比池溶液的吸光度為零，然后讓同一束光通過(guò)樣品，使得吸光度比較真實(shí)地反映待測(cè)物質(zhì)的濃度，所以參比溶液的選擇非常重要。如果僅有待測(cè)物質(zhì)與顯色劑的反應(yīng)產(chǎn)物有吸收，可用溶劑或蒸餾水作參比溶液。如果顯色劑有顏色，并在測(cè)定波長(zhǎng)下有吸收，則用顯色劑溶液作參比溶液，所加入顯色劑及其它試劑的量，與試樣中的加入量應(yīng)一致。如果樣品中其它組分本身的顏色對(duì)測(cè)定有干擾，而所用顯色劑沒(méi)顏色，則用不加顯色劑的樣品溶液作參比液。

　　2.測(cè)試波長(zhǎng)的選擇

　　當(dāng)用普析紫外分光光度計(jì)對(duì)溶液進(jìn)行測(cè)定時(shí)，先需要選擇合適的測(cè)量波長(zhǎng)。選擇的依據(jù)是該被測(cè)溶液的吸收曲線。在一般情況下，我們總是選擇大吸收波長(zhǎng)作為測(cè)量波長(zhǎng)，這樣可以提高靈敏度。而在有些情況下大吸收峰很尖銳、吸收過(guò)大或附近有干擾存在，就不能選大吸收波長(zhǎng)，而必須在保證有一定靈敏度的情況下，選擇吸收曲線中的其它波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定，以消除干擾。繪制吸收曲線是正確選擇波長(zhǎng)的有效手段和方法。

　　3.吸光度范圍的選擇

　　試樣在不同吸光度時(shí)，濃度的相對(duì)誤差不同，一般選擇0.2-0.8之間，濃度相對(duì)誤差較小，可以通過(guò)改變吸收池厚度、檢測(cè)波長(zhǎng)或待測(cè)溶液濃度，使吸光度讀數(shù)在適宜范圍內(nèi)。

　　4.狹縫寬度的選擇

　　狹縫寬度不僅影響光譜的度，也影響吸光度值，在定量分析時(shí)，為了得到足夠的測(cè)量信號(hào)，應(yīng)采用較大狹縫。在定性分析時(shí)，為了提高分辨率，應(yīng)采用較小狹縫，以獲得精細(xì)的光譜結(jié)構(gòu)。

　　5.吸收池的選擇和使用

　　吸收池的規(guī)格應(yīng)根據(jù)被測(cè)溶液顏色深淺來(lái)確定，一般是被測(cè)溶液顏色深時(shí)選光程短的，顏色淺時(shí)選光程長(zhǎng)的，同一實(shí)驗(yàn)使用同一規(guī)格同一套吸收池。在定量測(cè)量之前需要對(duì)吸收池作校正和配對(duì)工作，吸收池不匹配時(shí)，對(duì)測(cè)量產(chǎn)生誤差，吸收池方向不同，透光率亦有差異，使用時(shí)應(yīng)注意方向。比色皿毛玻璃一面的上端有一個(gè)箭頭，應(yīng)與光路保持一致。另外，使用時(shí)，不要把溶液注得太滿，以防在推動(dòng)比色皿架時(shí)溶液溢出皿外。如透光壁外有溶液存在，要擦干再測(cè)，否則將產(chǎn)生誤差。

　　6.溫度的選定

　　溫度對(duì)溶液顏色的深淺和吸光度都有影響，溫度升高，紫外一可見(jiàn)光譜吸收向短波方向移動(dòng)。故在繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和測(cè)定樣品時(shí)，應(yīng)保持溫度一致，通常在室溫條件下進(jìn)行。

　　由于普析紫外分光光度計(jì)引起的測(cè)量總誤差除來(lái)自儀器自身性能、測(cè)量條件外，還來(lái)自于分析過(guò)程的各個(gè)步驟，如試樣處理、分離富集等，可能由于化學(xué)操作引起待測(cè)組分的損失和雜質(zhì)的引入。所以出現(xiàn)不可接受的測(cè)量誤差時(shí)要從多方面分析。